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PRUEBA DE COOMBS

Sinonimia: prueba de antiglobulina, PAG.

Método: suero antiglobulina

Muestra:
prueba de Coombs directa: sangre entera anticoagulada con EDTA Na2
prueba de Coombs indirecta: suero

Valores de referencia: negativo

Significado clínico:
La prueba de antiglobulinas (PAG) se basa en el principio de que los anticuerpos antiglobulina humana inducen la aglutinación de los eritrocitos revestidos con globulina.
Cuando la PAG se utiliza para detectar anticuerpos fijados en eritrocitos in vivo, se llama prueba directa de antiglobulinas o de Coombs (PCD). Cuando la PAG se emplea para detectar anticuerpos en el suero por sensibilización de los eritrocitos in vitro, se conoce como prueba indirecta de antiglobulinas o de Coombs (PCI). Los sueros antiglobulinas que se obtienen de conejos inmunizados pueden ser de amplio espectro (con anticuerpos contra inmunoglobulinas humanas y componentes del complemento) o pueden ser monoespecíficos (anti IgG, anti-IgM, anti-IgA, anti- C3+C4, anti C3b, anti-C3d, anti-C4b y anti C4d).
Aunque la PAG de una prueba muy sensible, una prueba negativa no excluye la presencia de anticuerpos en los eritrocitos (se calculan en 100 a 500 moléculas de IgG fijadas a los eritrocitos para que sean detectadas).

Prueba directa falsa positiva: algunas drogas incluyendo penicilinas y cefalosporinas pueden causar PDC positiva: -metildopa, levodopa, quinidina, insulina, ácido mefenámico, sulfonamidas, tetraciclinas. Los anticuerpos contra metildopa son predominantemente IgG.
Observación no son estrictamente falsos positivos ya que estas drogas pueden provocar anemias hemolíticas autoinmunes.
Causas de falsos positivos en PCD:
1- material mal lavado
2-restos de detergentes
3-muestra conservada en la heladera y no procesada de inmediato (hay activación del complemento
4-exceso de refrigeración
5- lavado inadecuado de los hematíes de sangre de cordón (gelatina de Wharton)
Causas de falsos positivo en PCI
ídem 1,2,4,
5-Solución fisiológica inapropiada, pH, resina de intercambio etc
6-restos de componente monoclonal por lavado insuficiente

Prueba indirecta falsa positiva: la metildopa provoca aproximadamente el 25% de PIC positivas en pacientes hospitalizados. La levodopa y el ácido mefenámico también causan reacción positiva.

Utilidad clínica:

La prueba indirecta de Coombs se utiliza en los siguientes casos:

  • - Screening de anticuerpos desconocidos en el suero usando hematíes conocidos. Se utiliza principalmente para el screening de anticuerpos pre-transfusionales y en el primer trimestre de embarazo.
  • - Evaluación de anemias hemolíticas. Esta prueba se usa en paneles, en titulaciones y en cross-matches.
  • - Evaluación de antígenos: Muchos antígenos eritrocitarios se detectan con esta prueba: Fy, K, k, S, s, como también antígenos poco frecuentes como: Lua, Coa, Kpb o variantes débiles de antigenos : Du, DVI, Cw.

La prueba directa de Coombs se utiliza en los siguientes casos:

  • - Diagnóstico de hemólisis autoinmune.
  • - Diagnóstico de enfermedad hemolítica del recién nacido.
  • - Diagnóstico de hemólisis inducida por drogas.
  • - Evaluación de reacción hemolítica aguda y retardada.

Variables por enfermedad:

Prueba positiva:
PIC: brucelosis, malaria, algunos pacientes con linfoma de Hodgkin, 20% de pacientes con leucemia linfocítica crónica, 33% de pacientes con leucemia mielocítica crónica, púrpura trombocitopénica idiopática con anemia hemolítica, convalecencia de infección por Mycoplasma pneumoniae, lupus eritematoso sistémico, eritroblastosis fetal (debido a anticuerpos Rh, Kel, Kidd, Duffy).
PDC: lupus eritematoso sistémico.

Prueba negativa:
PIC: mieloma múltiple, eritroleucemia, abetalipoproteinemia, macroglobulinemia de Waldenström, esferocitosis hereditaria, eliptocitosis hereditaria, hemoglobinuria paroxística nocturna, poliarteritis nodosa, enfermedad hemolítica del recién nacido debida a incompatibilidad ABO.

Nota: tener en cuenta que de acuerdo a la concentración del componente monoclonal puede haber falsos positivos

Variables por drogas:

Prueba positiva:
PIC: asparaginasa, carbromal, metildopa, rifampicina.
PDC: ácido aminosalícilico, ampicilina, ciclofosfamida, insecticidas, isoniazida, ácido mefenámico, meticilina, metildopa, penicilina G, quinina.

Bibliografía:

1. LotharT. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and assessment of clinical laboratory results, English edition, 1998.
2. Jacobs D.S., Demott W.R. Grady H. et al., Laboratory Test Handbook, Edit by Lexi-Comp Inc., Cleveland, United States of America, 4th edition, 1996.
3. Young D. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Test. AACC, second edition, 1997.
4. Young D. and Friedman R. Effects of Disease on Clinical Laboratory Test, edited by AACC, third edition, 1997.
5. Lockitch G. Handbook of Diagnostic Biochemistry and Hematology in Normal Pregnancy. CRC Press, Inc. United States of America, 1993.
6. Young D. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Test, AACC, third edition, 1990.
7. Todd-Sanford-Davidsohn. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio. Salvat. 8ª edición 1988