Puesto que la morbilidad y la transmisi\u00f3n de las infecciones por helmintos est\u00e1n directamente relacionadas con la prevalencia y la intensidad de la infecci\u00f3n, existe una necesidad especial de t\u00e9cnicas mejoradas, tales como la metodolog\u00eda de reacci\u00f3n de polimerasa en cadena (PCR), para la evaluaci\u00f3n de la intensidad de la infecci\u00f3n para ambos prop\u00f3sitos.<\/p>\n
Un equipo internacional de cient\u00edficos dirigidos por los del Instituto de Investigaci\u00f3n M\u00e9dica QIMR Berghofer (Herston, Australia) recogieron muestras fecales de un total de 680 personas, procedentes de las comunidades rurales: 467 de muestras proven\u00edan de Timor-Leste y 213 muestras eran procedentes de Camboya. Se extrajo el ADN de las muestras de heces y fue sometido a dos reacciones de PCR m\u00faltiplex en tiempo real; la primera dirigida tanto a helmintos como a protozoos. Las muestras tambi\u00e9n fueron objeto del m\u00e9todo de concentraci\u00f3n por flotaci\u00f3n con nitrato de sodio para la identificaci\u00f3n y cuantificaci\u00f3n de los huevos de helmintos (STH) transmitidos por los suelos y flotaci\u00f3n centr\u00edfuga con sulfato de zinc para la detecci\u00f3n de par\u00e1sitos protozoarios.<\/p>\n
La extracci\u00f3n de ADN se realiz\u00f3 utilizando el kit de Aislamiento de ADN, Powersoil (Mo Bio, Carlsbad, CA, EUA). El ADN extra\u00eddo analizado en dos reacciones de PCR en tiempo real pentaplex. La primera fue un ensayo cuantitativo para\u00a0Necator americanus, Ancylostoma spp. (A. duodenale, A. ceylanicum), Ascaris spp, Trichuris trichiura.; la segunda fue un ensayo semi-cuantitativo para Entamoeba histolytica, Cryptosporidium spp., Giardia duodenalis, y Strongyloides stercoralis.<\/em> La prueba Rotor-Gene 6000 (Qiagen, Melbourne, Australia) fue utilizada para todos los ensayos de PCR, con reacciones creadas para ambas reacciones de PCR.<\/p>\n La prevalencia mayor del par\u00e1sito fue detectada usando la PCR multiplex (anquilostomas 2,9 veces m\u00e1s alta, Ascaris 1,2 veces, Giardia 1.6 veces, junto con una detecci\u00f3n superior del poliparasitismo un efecto que se vio magnificado a medida que el n\u00famero de par\u00e1sitos presentes aumentaba (uno: 40,2% vs. 38,1%, dos: 30,9% vs 12,9%, tres: 7,6% frente a 0,4%, cuatro: 0,4% frente a 0%) Aunque, todas las muestras positivas pata STH eran infecciones de baja intensidad mediante microscop\u00eda seg\u00fan la definici\u00f3n en las directrices oficiales, la carga de ADN, detectada por PCR m\u00faltiplex, suger\u00eda infecciones de mayor intensidad.<\/p>\n Los autores concluyeron que la PCR multiplex, adem\u00e1s de mostrar una sensibilidad superior, permiti\u00f3 una determinaci\u00f3n m\u00e1s exacta de la intensidad, cuando la infecci\u00f3n era por Ascaris, anquilostomas y Giardia,<\/em> en comparaci\u00f3n con la microscop\u00eda, especialmente en muestras que se pudo observar que ten\u00edan poliparasitismo. El rendimiento superior de la PCR multiplex para detectar poliparasitismo y determinar con m\u00e1s exactitud la intensidad de la infecci\u00f3n sugiere que es una t\u00e9cnica m\u00e1s adecuada para uso en estudios epidemiol\u00f3gicos y para la monitorizaci\u00f3n de ensayos de intervenci\u00f3n de gran escala. El estudio fue publicado el 28 de enero de 2016, en la revista Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.<\/p>\n